В ПОДЗОНЕ 3 Б ПЦР-ЛАБОРАТОРИИ ОСУЩЕСТВЛЯЮТ
1) учет результатов амплификации нуклеиновых кислот с помощью электрофореза и (или) гибридизационно-ферментным методом
2) амплификацию нуклеиновых кислот и учет результатов амплификации с применением гибридизационно-флуоресцентной детекции (+)
3) учет результатов реакции амплификации нуклеиновых кислот методом секвенирования и (или) на ДНК-чипах
4) выделение нуклеиновых кислот
Подзона 3 Б ПЦР-лаборатории предназначена для проведения амплификации нуклеиновых кислот, а также регистрации результатов реакции амплификации с применением гибридизационно-флуоресцентной детекции. Это ключевой этап молекулярно-генетических исследований, требующий высокой степени защиты от контаминации, поскольку на данном этапе происходит многократное копирование генетического материала. Использование гибридизационно-флуоресцентной детекции обеспечивает точность и чувствительность анализа, что особенно важно при диагностике инфекционных и наследственных заболеваний.Технические требования к оборудованию и персоналу в этой зоне строго регламентированы, так как ошибки в этой части исследования могут привести к ложноположительным или ложноотрицательным результатам. Контроль условий работы, наличие ламинарных шкафов, термоциклеров с закрытой системой и строгий регламент перемещения персонала между зонами являются обязательными условиями.
| Зона | Наименование этапа | Основные процессы | Требования к оборудованию | Контроль контаминации |
|---|---|---|---|---|
| 1 (А) | Прием и регистрация проб | Маркировка, хранение, подготовка к выделению | Холодильники, ПК, СИСТ | Минимальный |
| 2 (Б) | Выделение нуклеиновых кислот | Лизис, очистка ДНК/РНК | Ламинар, центрифуги, автоматические станции | Высокий |
| 3 (Б) | Амплификация и детекция | ПЦР, гибридизация, флуоресцентная регистрация | Термоциклеры, Real-time ПЦР аппараты | Критически высокий |
| 4 (В) | Анализ и учет результатов | Интерпретация, архивирование | Компьютеры, ПО для анализа | Низкий |
