МЕТОДОМ АМПЛИФИКАЦИИ СИГНАЛА СЧИТАЮТ
1) амплификацию с удалением (вытеснением) цепи (SDA)
2) полимеразную цепную реакцию
3) лигазную цепную реакцию (ЛЦР)
4) сигнальную амплификацию (bDNA assay) (+)
Сигнальная амплификация — это метод увеличения детектируемого сигнала без непосредственного умножения самой нуклеиновой кислоты. В отличие от полимеразной цепной реакции (ПЦР) или других методов амплификации с копированием, сигнальная амплификация направлена на повышение чувствительности за счёт усиления сигнала, что позволяет обнаружить даже малые количества целевого анализа. Такой подход часто применяется в диагностике, когда важно минимизировать ошибочные амплификации и повысить точность измерений.
Методы амплификации с копированием, такие как ПЦР, лигазная цепная реакция и амплификация с удалением цепи, работают за счёт множества циклов синтеза и удвоения целевых молекул. В отличие от них, сигнальная амплификация, например bDNA assay, использует гибридизационные методы и каскады ферментативных реакций для генерации усиленного сигнала.
| Метод | Принцип действия | Цель амплификации | Пример использования |
|---|---|---|---|
| Полимеразная цепная реакция (ПЦР) | Удвоение ДНК путём циклического синтеза с помощью ДНК-полимеразы | Амплификация целевой нуклеиновой кислоты | Диагностика инфекций, генетические тесты |
| Лигазная цепная реакция (ЛЦР) | Соединение олигонуклеотидов с помощью лигазы для выявления мутаций | Амплификация целевых последовательностей с высокой специфичностью | Определение точечных мутаций |
| Амплификация с удалением цепи (SDA) | Избирательное удвоение ДНК с использованием рестриктаз и полимераз | Экспоненциальное умножение нуклеиновой кислоты без термоциклирования | Быстрая диагностика бактериальных инфекций |
| Сигнальная амплификация (bDNA assay) | Усиление сигнала гибридизацией и ферментативным каскадом | Повышение чувствительности детекции без увеличения количества ДНК | Количественное определение вирусной нагрузки |