Флуоресцентную гибридизацию in situ или метод fish применяют для детекции

ФЛУОРЕСЦЕНТНУЮ ГИБРИДИЗАЦИЮ IN SITU ИЛИ МЕТОД FISH ПРИМЕНЯЮТ ДЛЯ ДЕТЕКЦИИ
1) и определения положения специфической последовательности ДНК на метафазных хромосомах или интерфазных ядрах in situ (+)
2) в тканях искомых веществ при обработке специфическими антителами
3) и определения положения специфической последовательности РНК в ходе амплификации исследуемой последовательности после их гибридизации
4) групп-специфических аллельных вариантов генов

Метод флуоресцентной гибридизации in situ (FISH) основан на использовании флуоресцентно меченых зондов, которые связываются с комплементарными участками ДНК. Это позволяет визуализировать определённые последовательности непосредственно на хромосомах или в интерфазных ядрах клеток без необходимости их выделения. Технология широко применяется в цитогенетике для выявления хромосомных аномалий, таких как делеции, дупликации, транслокации или наличие дополнительных копий генов.FISH особенно полезен при диагностике наследственных заболеваний, определении положения генов, а также в онкологической практике — например, для выявления амплификации онкогенов или химерных генов, возникающих при перестройках. Метод высокоспецифичен, не требует амплификации, как в ПЦР, и предоставляет пространственную информацию о расположении ДНК внутри клетки.

Параметр Описание
Метод Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH)
Мишень Специфические последовательности ДНК
Материал Метафазные хромосомы или интерфазные ядра
Тип зондов Флуоресцентно меченые олигонуклеотиды
Применение Диагностика хромосомных аномалий, онкогенные перестройки
Преимущества Высокая специфичность, визуализация in situ, возможность оценки структуры ядра
Ограничения Не выявляет мутации точек, требует микроскопии, ограниченная чувствительность