ФЛУОРЕСЦЕНТНУЮ ГИБРИДИЗАЦИЮ IN SITU ИЛИ МЕТОД FISH ПРИМЕНЯЮТ ДЛЯ ДЕТЕКЦИИ
1) и определения положения специфической последовательности ДНК на метафазных хромосомах или интерфазных ядрах in situ (+)
2) в тканях искомых веществ при обработке специфическими антителами
3) и определения положения специфической последовательности РНК в ходе амплификации исследуемой последовательности после их гибридизации
4) групп-специфических аллельных вариантов генов
Метод флуоресцентной гибридизации in situ (FISH) основан на использовании флуоресцентно меченых зондов, которые связываются с комплементарными участками ДНК. Это позволяет визуализировать определённые последовательности непосредственно на хромосомах или в интерфазных ядрах клеток без необходимости их выделения. Технология широко применяется в цитогенетике для выявления хромосомных аномалий, таких как делеции, дупликации, транслокации или наличие дополнительных копий генов.FISH особенно полезен при диагностике наследственных заболеваний, определении положения генов, а также в онкологической практике — например, для выявления амплификации онкогенов или химерных генов, возникающих при перестройках. Метод высокоспецифичен, не требует амплификации, как в ПЦР, и предоставляет пространственную информацию о расположении ДНК внутри клетки.
| Параметр | Описание |
|---|---|
| Метод | Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH) |
| Мишень | Специфические последовательности ДНК |
| Материал | Метафазные хромосомы или интерфазные ядра |
| Тип зондов | Флуоресцентно меченые олигонуклеотиды |
| Применение | Диагностика хромосомных аномалий, онкогенные перестройки |
| Преимущества | Высокая специфичность, визуализация in situ, возможность оценки структуры ядра |
| Ограничения | Не выявляет мутации точек, требует микроскопии, ограниченная чувствительность |
